230 likes | 512 Views
oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a BIOPTICKÁ LABORATOŘ- PR lab spol.s r.o. KLASIKA versus KIT. Výrobce použitých kitů BIO-OPTICA , dodavatel ZENA-R, spol.s r.o. KLASIKA versus KIT. ALCIÁN VAN-GIESON GRAM GIESON-ELASTIKA TRICHROM G Ö MORI GROCOT barvení PEROPERAČNÍ BIOPSIE.
E N D
oddělení PATOLOGIE- NsP Nový Jičín a BIOPTICKÁ LABORATOŘ- PR lab spol.s r.o.
KLASIKA versus KIT Výrobce použitých kitů BIO-OPTICA, dodavatel ZENA-R, spol.s r.o.
KLASIKA versus KIT • ALCIÁN • VAN-GIESON • GRAM • GIESON-ELASTIKA • TRICHROM • GÖMORI • GROCOT • barvení PEROPERAČNÍ BIOPSIE
ALCIÁN barvení kyselých mukopolysacharidů 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 3. diferencování v kyselém alkoholu 4. modrání jader v obyčejné vodě 10min 5. 1% ALCIÁNOVÁ MODŘ 10min 6. oplach destil.vodou 7. 1% KYSELINA FOSFOMOLYBDENOVÁ 5min 8. oplach destil.vodou 9. PIKROFUCHSIN HALE 5min 10. osušit filtračním papírem, neoplachovat! 11. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat Klasická metoda KIT Alcian blu pH2,5(04-160802) • odparafinovat, destil.voda • 10 kapek REAGENT A 30min • bez oplachu, jen slít • 10 kapek REAGENT B 10min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT C 5min • oplach destil.voda • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla:13,23kč Doba barvení 50min Doba barvení 40min
Klasická metoda kyselé mukopolysacharidy MODRO-ZELENĚ 1. 2. 3. KIT
VAN-GIESONbarvení kolagenu 1. řezy odparafinovat 2. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 3. modrat v pramenité vodě (bez diferenciace!!) 10min 4. PIKROFUCHSIN 5min 5. osušit filtračním papírem 6. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat Klasická metoda KIT Van Gieson Trichrome(04-030802) • odparafinovat, destil.voda • 5+5 kapek REAGENT A+B 10min • tekoucí voda 10min • 10 kapek REAGENT C 10min • krátký oplach destil.voda • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 12,71kč Doba barvení 35min Doba barvení 25min
Klasická metoda kolagen TŘEŠŇOVĚ-ČERVENÁ 1. 2. KIT
GRAMbarvení bakterií 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. JÁDROVÁ ČERVEŇ 5 – 10min 3. oplach destil.vodou 4. GENCIANVIOLEŤ(filtrovat na tkáň) 10min 5. oplach LUGOLEM 6. LUGOL 5min 7. diferencovat ACETON : ALKOHOL 1:1 8. osušit filtračním papírem 9. odvodnit krátce od acetonu, projasnit, zamontovat Klasická metoda KIT Gram(04-100802) • odparafinovat, destil.voda • Coplinová nádoba REAGENT A 56-58°C 15min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT B 3min • bez oplachu, nechat odkapat • 10 kapek REAGENT C 3min • oplach destil.voda • okapat a osušit vzduchem 10min • Coplinová nádoba REAGENT D protřepat 1min • Coplinová nádoba REAGENT E protřepat 1min • očistit xylenem, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 40min Doba barvení 30min
Klasická metoda bakterie GRAM+ MODŘE bakterieGRAM- ČERVENĚ 1. 2. 3. KIT
GIESON-ELASTIKAbarvení elastických vláken Klasická metoda 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. RESORCIN-FUCHSIN při 56°C 1,30hod 3. osušit filtračním papírem 4. diferencovat v 70% alkoholem (až zůstanou vlákna červenofialová) 5. WEIGERTŮV HEMATOXYLIN 5min 6. oplach destil.vodou 7. modrání v pramenité vodě 10min 8. PIKROFUCHSIN HALE 5min 9. osušit filtračním papírem 10. krátce odvodnit, projasnit, zamontovat KIT Weigert long method(04-050802) for elastic fibers • odparafinovat, destil.voda • 5+5 kapek REAGENT A+REAGENT B 5min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT C 5min • oplach destil.voda • Coplinová nádoba REAGENT D přes noc • osušit filtračním papírem • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT E 10min • oplach destil.voda • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 24 hodin ! Doba barvení 115min
Klasická metoda elastická vlákna ČERVENO-FIALOVÉ KIT MODRO-ČERNÉ 1. 2. 3. KIT
TRICHROM barvení kolagenu Klasická metoda (ZELENÝ) 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. HARRISŮV HEMATOXYLIN 5min 3. oplach destil.vodou 4. diferencovat kys.alkoholem 5. modrat v tekoucí vodě 10min 6. FUCHSIN S 3min 7. oplach destil.vodou 8. 1% kys.FOSFOMOLYBDENOVÁ 5min 9. oplach destil.vodou 10.SVĚTLÁ ZELEŇ 3min 11.oplach 1% kyselinou OCTOVOU 12.1% kyselina OCTOVÁ 2min 13.oplach destil.vodou 14.odvodnit, projasnit, zamontovat KIT Masson Trichrome(04-010802) method with aniline blue • odparafinovat, destil.voda • 6+6 kapek REAGENT A+REAGENT B 10min • neoplachovat, jen slít • 10 kapek REAGENT C 4min • krátký oplach destil.vodou • 10 kapek REAGENT D 4min • oplach destil.vodou • 10 kapek REAGENT E 10min • bez oplachu, jen slít • 10 kapek REAGENT F 5min • oplach destil.vodou • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 20,79kč Doba barvení 35min Doba barvení 35min
Klasická metoda kolagenní vazivo ZELENĚ KIT- MODŘE 1. 2. 3. KIT
GÖMORIbarvení retikulinových vláken KIT Silver Impregnation(04-040801) for reticulum Klasická metoda 1. řezy odparafinovat, destil.voda 2. 0,25% MANGANISTAN DRASELNÝ 10min 3. oplach destil.vodou 4. 2% PYROSIŘIČITAN DRASELNÝ 1min 5. oplach destil.vodou 6. 2% SÍRAN ŽELEZITO-AMONNÝ 1min 7. pořádný oplach destil.vodou 8. impregnace STŘIBŘICÍM ROZTOKEM 1min 9. pořádný oplach destil.vodou 10.REDUKCE–roztokem formalínu 5min 11.oplach destil.vodou 12.1% CHLORID ZLATITÝ 7min 13.oplach destil.vodou 14.5% SÍRNATAN SODNÝ 3min 15.oplach destil.vodou 16.JÁDROVÁ ČERVEŇ 5-10min 17.oplach destil.vodou 18.odvodnit, projasnit, zamontovat • řezy odparafinovat, destil.voda • 5+5kapek REAGENT A+B 5min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT C 3min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT D 3min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT E 3min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT F 5min • oplach destil.voda • 10 kapek REAGENT G 5min • tekoucí voda 5min • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 35min Doba barevní 45min
Klasická metoda retikulinová vlákna ČERNĚ 2. 1. KIT
GROCOTbarvení plísní Klasická metoda KIT Grocott(04-043823) 1. odparafinovat, destil.voda 2. 10 kapek REAGENT A 20min 3. krátký oplach tekoucí vodou 4. 10 kapek REAGENT B 1min 5. tekoucí voda 5min 6. krátký oplach destil.vodou 7. do Coplinové nádoby smíchat: 17ml destil.vody +20 kapek REAGENT C +10 kapek REAGENT D +20 kapek REAGENT E inkubace při 60°C 1hodina 8. vychladnout 10min 9. krátký oplach destil.voda 10. 10 kapek REAGENT F 3min 11. oplach destil.voda 12. 10 kapek REAGENT G 5min 13. oplach tekoucí voda 14. 10 kapek REAGENT H 30sekund 15. odvodnit, projasnit, zamontovat • řezy odparafinovat, destil.voda • 5% KYS.CHROMOVÁ 1hod • vypírat pod tekoucí vodou • projasnění 1% SIŘIČITAN SODNÝ 1min • oplach destil.vodou 3x • STŘÍBŘÍCÍ ROZTOK při 56°C 1-2hod • oplach destil.vodou 3x • 1% CHLORID ZLATITÝ 5min • oplach destil.vodou • 5% SIRNATAN SODNÝ 3min • oplach destil.vodou • JÁDROVÁ ČERVEŇ 5-10min • oplach destil.vodou • odvodnit, projasnit, zamontovat Cena barvení jednoho skla: 25,94kč Doba barvení 110min Doba barvení cca 145min
Klasická metoda plísně ČERNĚ 1. 2. 3. KIT
BARVENÍ peroperační biopsie „ZMRAZÁKU“ • KIT –hematoxylin • Rapid frozen sections(04-061010) • REAGENT A 1min • oplach tekoucí voda • REAGENT B 5x oplach • oplach tekoucí voda • REAGENT C 30sekund • oplach 95% etanol • oplach 95% etanol • oplach čistý líh • oplach čistý líh • oplach xylen • oplach xylen • zamontovat • Klasická metoda -hematoxylin • HŘEBÍČKOVÝ OLEJ 2-3vteřiny, slít • osušit filtračním papírem • oplach 70% alkoholem • KOĎOUSKŮV HEMATOXYLIN 1-3min • oplach destil.vodou • modrání ve čpavkové vodě 1min • oplach destil.vodou • EOSIN 1min • oplach destil.vodou • odvodnit, projasnit, zamontovat cena 9,45kč Doba barevní 2-3min Doba barvení 6-8min • TOLUIDINOVÁ MODŘ • aceton 2-3vteřiny, slít, osušit • 1%TOLUIDINOVÁ MODŘ 1min • oplach destil. vodou • odvodnit od acetonu, projasnit, zamontovat • QUICK MGG QUICK STAIN(04-090805) • osušit vzduchem • REAGENT A 5x po 1 sekundě • REAGENT B 5x po 1 sekundě • REAGENT C 3-5 po 1 sekundě • oplach vodou • osušit vzduchem cena 12,29kč Doba barvení 20sekund Doba barvení 2-3min
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin QUICK (MGG QUICK STAIN) TOLUIDINOVÁ MODŘ
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)
Klasická metoda-hematoxylin KIT-hematoxylin TOLUIDINOVÁ MODŘ QUICK (MGG QUICK STAIN)
2000 1995 2005
KLASIKA versus KIT AUTOŘI: Daniela Galiová Petra Mariančíková Fotografické snímky preparátů: MUDr.Libor Kudělka Děkujeme za pozornost